ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਪ੍ਰਯੋਗ

ਪ੍ਰਯੋਗ ਦਾ ਸਿਧਾਂਤ

ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦਾ ਉਦੇਸ਼ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਆਮ ਅਤੇ ਅਸਧਾਰਨ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨਾਂ ਦਾ ਪਤਾ ਲਗਾਉਣਾ ਅਤੇ ਪੁਸ਼ਟੀ ਕਰਨਾ ਹੈ।

ਵੱਖ-ਵੱਖ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਕਿਸਮਾਂ ਦੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਚਾਰਜ ਅਤੇ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਬਿੰਦੂਆਂ ਦੇ ਕਾਰਨ, ਇੱਕ ਖਾਸ pH ਬਫਰ ਘੋਲ ਵਿੱਚ, ਜਦੋਂ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਦਾ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਬਿੰਦੂ ਬਫਰ ਘੋਲ ਦੇ pH ਤੋਂ ਘੱਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਇੱਕ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਚਾਰਜ ਰੱਖਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਐਨੋਡ ਵੱਲ ਮਾਈਗਰੇਟ ਕਰਦਾ ਹੈ। ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ, ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਚਾਰਜ ਵਾਲਾ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਕੈਥੋਡ ਵੱਲ ਵਧਦਾ ਹੈ।

ਇੱਕ ਖਾਸ ਵੋਲਟੇਜ ਦੇ ਅਧੀਨ ਅਤੇ ਇੱਕ ਖਾਸ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਸਮੇਂ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਚਾਰਜਾਂ ਅਤੇ ਅਣੂ ਭਾਰਾਂ ਵਾਲੇ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਪ੍ਰਵਾਸ ਦਿਸ਼ਾਵਾਂ ਅਤੇ ਗਤੀ ਪ੍ਰਦਰਸ਼ਿਤ ਕਰਦੇ ਹਨ। ਇਹ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਜ਼ੋਨਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰਨ ਦੀ ਇਜਾਜ਼ਤ ਦਿੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨਾਂ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕਰਨ ਲਈ ਇਹਨਾਂ ਜ਼ੋਨਾਂ 'ਤੇ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਕਲੋਰੀਮੈਟ੍ਰਿਕ ਜਾਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਟਿਕ ਸਕੈਨਿੰਗ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਤਰੀਕਾ pH 8.6 ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਹੈ।

ਸਾਇਟੋਪਲਾਜ਼ਮ ਦੇ ਅੰਦਰ, ਗਲਾਈਕੋਜਨ ਜਾਂ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡ ਪਦਾਰਥਾਂ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਮਿਊਕੋਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਜ਼, ਮਿਊਕੋਪ੍ਰੋਟੀਨ, ਗਲਾਈਕੋਪ੍ਰੋਟੀਨ, ਗਲਾਈਕੋਲਿਪੀਡਜ਼, ਆਦਿ) ਵਿੱਚ ਮੌਜੂਦ ਈਥੀਲੀਨ ਗਲਾਈਕੋਲ ਗਰੁੱਪ (CHOH-CHOH) ਨੂੰ ਪੀਰੀਅਡਿਕ ਐਸਿਡ ਦੁਆਰਾ ਆਕਸੀਡਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਐਲਡੀਹਾਈਡ ਗਰੁੱਪ (CHOHCHO) ਵਿੱਚ ਬਦਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। ਇਹ ਐਲਡੀਹਾਈਡ ਸਮੂਹ ਰੰਗਹੀਣ ਜਾਮਨੀ-ਲਾਲ ਸ਼ਿਫ ਰੀਐਜੈਂਟ ਨਾਲ ਮਿਲਦੇ ਹਨ, ਇੱਕ ਜਾਮਨੀ-ਲਾਲ ਡਾਈ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ ਜੋ ਸੈੱਲ ਵਿੱਚ ਪੋਲੀਸੈਕਰਾਈਡਸ ਮੌਜੂਦ ਹੁੰਦੇ ਹਨ। ਇਸ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਪੀਰੀਅਡਿਕ ਐਸਿਡ-ਸ਼ਿੱਫ (PAS) ਸਟੈਨਿੰਗ ਵਜੋਂ ਜਾਣਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸਨੂੰ ਪਹਿਲਾਂ ਗਲਾਈਕੋਜਨ ਸਟੈਨਿੰਗ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਸੀ।

ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿਧੀ

ਸਮੱਗਰੀ:ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟmemਬਰੇਨ, ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਯੰਤਰ(DYCP-38C ਅਤੇ ਬਿਜਲੀ ਸਪਲਾਈ DYY-6C), ਸੁਪੀਰੀਅਰ ਸੈਂਪਲ ਲੋਡਿੰਗ ਟੂਲ(ਪਾਈਪੇਟ), ਸਪੈਕਟ੍ਰੋਫੋਟੋਮੀਟਰ, ਕਲੋਰਮੈਟ੍ਰਿਕ ਕਯੂਵੇਟਸ, ਬਫਰ

ਬਫਰ:

(1) pH 8.6 TEB ਬਫਰ: ਵਜ਼ਨ 10.29 g ਟ੍ਰਿਸ, 0.6 g EDTA, 3.2 g ਬੋਰਿਕ ਐਸਿਡ, ਅਤੇ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਨੂੰ 1000 ਮਿ.ਲੀ.

(2) ਬੋਰੇਟ ਬਫਰ: ਭਾਰ 6.87 ਗ੍ਰਾਮ ਬੋਰੈਕਸ ਅਤੇ 5.56 ਗ੍ਰਾਮ ਬੋਰਿਕ ਐਸਿਡ, ਅਤੇ ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਨੂੰ 1000 ਮਿ.ਲੀ.

ਵਿਧੀ:

Pਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਹੱਲ ਦੀ ਮੁਰੰਮਤ

ਹੈਪਰੀਨ ਜਾਂ ਸੋਡੀਅਮ ਸਿਟਰੇਟ ਵਾਲੇ 3 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਖੂਨ ਨੂੰ ਐਂਟੀਕੋਆਗੂਲੈਂਟ ਵਜੋਂ ਲਓ। 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 2000 rpm 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ ਅਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮਾ ਨੂੰ ਰੱਦ ਕਰੋ। ਲਾਲ ਖੂਨ ਦੇ ਸੈੱਲਾਂ ਨੂੰ ਸਰੀਰਕ ਖਾਰੇ (750 rpm, ਹਰ ਵਾਰ 5 ਮਿੰਟ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਗੇਸ਼ਨ) ਨਾਲ ਤਿੰਨ ਵਾਰ ਧੋਵੋ। 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 2200 rpm 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ ਅਤੇ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟ ਨੂੰ ਰੱਦ ਕਰੋ। ਡਿਸਟਿਲ ਕੀਤੇ ਪਾਣੀ ਦੀ ਬਰਾਬਰ ਮਾਤਰਾ ਪਾਓ, ਫਿਰ ਕਾਰਬਨ ਟੈਟਰਾਕਲੋਰਾਈਡ ਦੀ ਮਾਤਰਾ 0.5 ਗੁਣਾ ਪਾਓ। 5 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਜ਼ੋਰ ਨਾਲ ਹਿਲਾਓ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਬਾਅਦ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਉਪਰਲੇ Hb ਘੋਲ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਲਈ 10 ਮਿੰਟ ਲਈ 2200 rpm 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।

ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਭਿੱਜਣਾ

ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ 3 ਸੈਂਟੀਮੀਟਰ × 8 ਸੈਂਟੀਮੀਟਰ ਦੀਆਂ ਪੱਟੀਆਂ ਵਿੱਚ ਕੱਟੋ। ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਸੰਤ੍ਰਿਪਤ ਹੋਣ ਤੱਕ pH 8.6 TEB ਬਫਰ ਵਿੱਚ ਭਿਓ ਦਿਓ, ਫਿਰ ਫਿਲਟਰ ਪੇਪਰ ਨਾਲ ਹਟਾਓ ਅਤੇ ਸੁਕਾਓ।

ਸਪਾਟਿੰਗ

ਕਿਨਾਰੇ ਤੋਂ ਲਗਭਗ 1.5 ਸੈਂਟੀਮੀਟਰ ਦੀ ਦੂਰੀ 'ਤੇ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ (ਮੋਟੇ ਪਾਸੇ) 'ਤੇ ਖੜ੍ਹਵੇਂ ਤੌਰ 'ਤੇ 10 μl ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਘੋਲ ਨੂੰ ਲੱਭਣ ਲਈ ਪਾਈਪੇਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।

ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ

ਬੋਰੇਟ ਬਫਰ ਘੋਲ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਚੈਂਬਰ ਵਿੱਚ ਡੋਲ੍ਹ ਦਿਓ। ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਚੈਂਬਰ ਦੇ ਕੈਥੋਡ ਸਿਰੇ 'ਤੇ ਸਪਾਟਡ ਸਾਈਡ ਨਾਲ ਰੱਖੋ। 30 ਮਿੰਟ ਲਈ 200 V ਤੇ ਚਲਾਓ.

ਇਲੂਸ਼ਨ

HbA ਅਤੇ HbA2 ਜ਼ੋਨਾਂ ਨੂੰ ਕੱਟੋ, ਉਹਨਾਂ ਨੂੰ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਟੈਸਟ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਰੱਖੋ, ਅਤੇ ਕ੍ਰਮਵਾਰ 15 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਅਤੇ 3 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ ਪਾਓ। ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਨੂੰ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ ਹੌਲੀ ਹੌਲੀ ਹਿਲਾਓ, ਫਿਰ ਮਿਲਾਓ.

ਕਲੋਰਮੈਟਰੀ

ਇਲੂਸ਼ਨ ਘੋਲ ਲਈ ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਨੂੰ ਜ਼ੀਰੋ ਕਰੋ ਅਤੇ 415 nm 'ਤੇ ਸੋਜ਼ਸ਼ ਨੂੰ ਮਾਪੋ।

ਗਣਨਾ

HbA2(%) = HbA2 ਟਿਊਬ ਦੀ ਸਮਾਈ / (HbA ਟਿਊਬ ਦੀ ਸਮਾਈ × 5 + HbA2 ਟਿਊਬ ਦੀ ਸਮਾਈ) × 100%

ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਗਣਨਾ

pH 8.6 TEB ਬਫਰ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਲਈ ਸੰਦਰਭ ਸੀਮਾ: HbA > 95%, HbA2 1%-3.1%

ਨੋਟਸ

ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਦਾ ਸਮਾਂ ਬਹੁਤ ਲੰਬਾ ਨਹੀਂ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ। ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੇ ਦੌਰਾਨ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਸੁੱਕਣਾ ਨਹੀਂ ਚਾਹੀਦਾ। ਜਦੋਂ HbA ਅਤੇ HbA2 ਸਪਸ਼ਟ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵੱਖ ਹੋ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਤਾਂ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਨੂੰ ਰੋਕੋ। ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਤੱਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਬੈਂਡ ਦੇ ਫੈਲਣ ਅਤੇ ਧੁੰਦਲੇਪਣ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਤੋਂ ਬਚੋ। ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਤਰਲ ਬੈਂਡ ਡਿਟੈਚਮੈਂਟ ਜਾਂ ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਧੱਬੇ ਦਾ ਕਾਰਨ ਬਣ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ HbA ਪੱਧਰਾਂ ਨੂੰ ਉੱਚਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।

ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਨਾਲ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਗੰਦਗੀ ਨੂੰ ਰੋਕੋ।

ਮੌਜੂਦਾ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਨਹੀਂ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ; ਨਹੀਂ ਤਾਂ, ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਬੈਂਡ ਵੱਖ ਨਹੀਂ ਹੋ ਸਕਦੇ।

ਹਮੇਸ਼ਾ ਸਾਧਾਰਨ ਵਿਅਕਤੀਆਂ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਨਿਯੰਤਰਣ ਵਜੋਂ ਜ਼ਰੂਰੀ ਜਾਣੇ ਜਾਂਦੇ ਅਸਧਾਰਨ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।

ਬੀਜਿੰਗ ਲਿਉਈ ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਹੀਮੋਗਲੋਬਿਨ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਲਈ ਪੇਸ਼ੇਵਰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਟੈਂਕ ਦਾ ਨਿਰਮਾਣ ਕਰਦੀ ਹੈ ਜੋ ਕਿ ਮਾਡਲ ਹੈDYCP-38Cਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਟੈਂਕ, ਅਤੇ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਟੈਂਕ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਪਾਵਰ ਸਪਲਾਈ ਦੇ ਦੋ ਮਾਡਲ ਉਪਲਬਧ ਹਨDYY-2CਅਤੇDYY-6Cਬਿਜਲੀ ਦੀ ਸਪਲਾਈ.

ਇਸ ਦੌਰਾਨ, ਬੀਜਿੰਗ Liuyi ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਗਾਹਕਾਂ ਲਈ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਆਕਾਰ ਨੂੰ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ. ਨਮੂਨੇ ਅਤੇ ਹੋਰ ਜਾਣਕਾਰੀ ਲਈ ਸਾਨੂੰ ਪੁੱਛਣ ਲਈ ਸੁਆਗਤ ਹੈ.

ਬੀਜਿੰਗ ਲਿਉਈ ਬ੍ਰਾਂਡ ਦਾ ਚੀਨ ਵਿੱਚ 50 ਸਾਲਾਂ ਤੋਂ ਵੱਧ ਇਤਿਹਾਸ ਹੈ ਅਤੇ ਕੰਪਨੀ ਪੂਰੀ ਦੁਨੀਆ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਉਤਪਾਦ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ। ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਸਾਲਾਂ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਇਹ ਤੁਹਾਡੀ ਪਸੰਦ ਦੇ ਯੋਗ ਹੈ!

ਅਸੀਂ ਹੁਣ ਭਾਈਵਾਲਾਂ ਦੀ ਤਲਾਸ਼ ਕਰ ਰਹੇ ਹਾਂ, OEM ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਟੈਂਕ ਅਤੇ ਵਿਤਰਕਾਂ ਦਾ ਸਵਾਗਤ ਹੈ.

ਜੇਕਰ ਤੁਹਾਡੇ ਕੋਲ ਸਾਡੇ ਉਤਪਾਦਾਂ ਲਈ ਕੋਈ ਖਰੀਦਦਾਰੀ ਯੋਜਨਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਸਾਡੇ ਨਾਲ ਸੰਪਰਕ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸੰਕੋਚ ਨਾ ਕਰੋ। ਤੁਸੀਂ ਸਾਨੂੰ ਈਮੇਲ 'ਤੇ ਸੁਨੇਹਾ ਭੇਜ ਸਕਦੇ ਹੋ[ਈਮੇਲ ਸੁਰੱਖਿਅਤ]ਜਾਂ[ਈਮੇਲ ਸੁਰੱਖਿਅਤ], ਜਾਂ ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਸਾਨੂੰ +86 15810650221 'ਤੇ ਕਾਲ ਕਰੋ ਜਾਂ Whatsapp +86 15810650221, ਜਾਂ Wechat: 15810650221 ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ