ਅਸੂਲ
ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਫਿਲਮ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਇੱਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਵਿਧੀ ਹੈ ਜੋ ਇੱਕ ਸਹਾਇਤਾ ਵਜੋਂ ਇੱਕ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਫਿਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਉਹ ਵਰਤਾਰਾ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਚਾਰਜ ਕੀਤੇ ਕਣ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਦੀ ਕਿਰਿਆ ਦੇ ਅਧੀਨ ਉਲਟ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਵੱਲ ਵਧਦੇ ਹਨ, ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਕਿਹਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਕਿਉਂਕਿ ਹਰੇਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦਾ ਇੱਕ ਖਾਸ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਬਿੰਦੂ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਜੇਕਰ ਇੱਕ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਇਸਦੇ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਬਿੰਦੂ ਤੋਂ ਘੱਟ pH ਵਾਲੇ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਚਾਰਜ ਹੋ ਜਾਵੇਗਾ ਅਤੇ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਵੱਲ ਵਧੇਗਾ।ਇਸ ਦੇ ਉਲਟ, ਇਹ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਧਰੁਵ ਵੱਲ ਜਾਂਦਾ ਹੈ.ਕਿਉਂਕਿ ਇੱਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਫੀਲਡ ਵਿੱਚ ਵਧਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਗਤੀ ਉਹਨਾਂ ਦੇ ਚਾਰਜ, ਅਣੂਆਂ ਦੀ ਸ਼ਕਲ ਅਤੇ ਆਕਾਰ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ, ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੇ ਸਾਰੇ ਪੀਐਚ 7.5 ਜਾਂ ਇਸ ਤੋਂ ਘੱਟ 'ਤੇ ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਪੁਆਇੰਟ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਜਦੋਂ ਸੀਰਮ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਨੂੰ ਚਲਾਉਣ ਲਈ pH 8.6 ਬਫਰ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਸਾਰੇ ਸੀਰਮ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਚਾਰਜ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਖੇਤਰ ਵਿੱਚ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪਾਸੇ ਵੱਲ ਵਧਣਗੇ।ਕਿਉਂਕਿ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸੀਰਮ ਪ੍ਰੋਟੀਨਾਂ ਦੇ ਇੱਕੋ pH 'ਤੇ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਚਾਰਜ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਣੂ ਦੇ ਕਣ ਆਕਾਰ ਵਿੱਚ ਵੱਖਰੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਾਈਗ੍ਰੇਸ਼ਨ ਦੀ ਗਤੀ ਵੱਖਰੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਉਹ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਵੱਖ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਪੁਆਇੰਟ ਅਤੇ ਸੀਰਮ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੇ ਅਣੂ ਵਜ਼ਨ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੀ ਸਾਰਣੀ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਹਨ:
| ਪ੍ਰੋਟੀਨ | ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਪੁਆਇੰਟਸ (PI) | ਅਣੂ ਭਾਰ |
| ਐਲਬਿਊਮਿਨ | 4. 88 | 69 000 |
| α1-ਗਲੋਲਿਨ | 5.00 | 200 000 |
| α2-ਗਲੋਲਿਨ | 5.06 | 300 000 |
| β-ਗਲੋਲਿਨ | 5.12 | 9 000 ~ 150 000 |
| γ-ਗਲੋਲਿਨ | 6.85~7.50 | 156 000~ 300 000 |
ਪ੍ਰਯੋਗ ਖੂਨ ਦੇ ਸੀਰਮ ਵਿੱਚ ਵੱਖੋ-ਵੱਖਰੇ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ (abbr. CAM) ਦੇ ਨਾਲ ਸਹਾਇਕ ਮੀਡੀਆ ਵਜੋਂ ਵੱਖ ਕਰਨਾ ਹੈ।CAM ਫੋਮਡ ਲੂਸ ਦੀ ਇੱਕ ਕਿਸਮ ਹੈeਚੰਗੀ ਵਰਦੀ ਦੇ ਨਾਲ ਫਿਲਮ, ਅਤੇ ਮੋਟਾਈ 0.1mm-1.5mm ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਖਾਸ ਪਾਣੀ ਸਮਾਈ ਹੈ.
CAM ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਲਈ ਸਮੱਗਰੀ, ਯੰਤਰ ਅਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ
ਨਮੂਨੇ:ਸਿਹਤਮੰਦ ਮਨੁੱਖੀ ਖੂਨ ਸੀਰਮ
ਸਾਧਨ:ਪਾਵਰ ਸਪਲਾਈ DYY-6C, ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਟੈਂਕ DYCP-38C, ਵਧੀਆ ਨਮੂਨਾ ਲੋਡਿੰਗ WD-9404
reagents
1) ਸੈਲੂਲੋਜ਼ ਐਸੀਟੇਟ ਝਿੱਲੀ 7X9cm
2) PH 8.6 ਬਾਰਬਿਟੋਲ ਬਫਰ ਘੋਲ (ਆਈਓਨਿਕ ਤਾਕਤ 0.05-0.09, ਇਹ 0.06 ਦਾ ਸਮਾਂ ਹੈ।): 1,84 ਗ੍ਰਾਮ ਡਾਈਥਾਈਲ ਬਾਰਬਿਟੂਰਿਕ ਐਸਿਡ ਲਓ, ਅਤੇ ਫਿਰ 1.03 ਗ੍ਰਾਮ ਡਾਈਥਾਈਲ ਸੋਡੀਅਮ ਪੈਂਟੋਬਾਰਬਿਟਲ ਲਓ, ਘੁਲਣ ਲਈ ਗਰਮ ਕਰਨ ਲਈ ਕੁਝ ਡਿਸਟਿਲਿਡ ਪਾਣੀ ਪਾਓ, ਅਤੇ ਬਣਾਓ। 1000ml ਤੱਕ;
3) ਦਾਗ: ਪੋਨਸੀਓ ਐਸ 0.2 ਜੀ, ਟ੍ਰਾਈਕਲੋਰੋਸੈਟਿਕ 3 ਜੀ, 100 ਮਿ.ਲੀ. ਡਿਸਟਿਲਡ ਪਾਣੀ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ;
4) TBS/T ਜਾਂ PBS/T: 45ml 95% ਈਥਾਨੌਲ, 5ml ਗਲੇਸ਼ੀਅਲ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ, 50ml ਡਿਸਟਿਲਡ ਵਾਟਰ ਸ਼ਾਮਿਲ ਕਰੋ;
5) ਸਫਾਈ ਹੱਲ: 70 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਐਨਹਾਈਡ੍ਰਸ ਈਥਾਨੌਲ, 30 ਮਿਲੀਲੀਟਰ ਗਲੇਸ਼ੀਅਲ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ।
ਪ੍ਰਯੋਗ ਮੇਥੋd
1) ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਤਿਆਰ ਕਰੋ: ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਬਾਰਬਿਟੋਲ ਬਫਰ ਘੋਲ 30 ਮਿੰਟ-8 ਘੰਟੇ ਵਿੱਚ ਡੁਬੋ ਦਿਓ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ, ਸੋਖਣ ਵਾਲੇ ਕਾਗਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਵਾਧੂ ਘੋਲ ਨੂੰ ਹਟਾਓ।
2) ਨਮੂਨੇ ਲੋਡ ਕੀਤੇ ਜਾ ਰਹੇ ਹਨ: ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਮੋਟੇ ਪਾਸੇ ਅਤੇ ਨਿਰਵਿਘਨ ਪਾਸੇ ਨੂੰ ਵੱਖ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਮੋਟੇ ਪਾਸੇ ਦੇ ਉੱਪਰਲੇ ਸਿਰੇ ਤੱਕ 1.5 ਸੈਂਟੀਮੀਟਰ ਦੀ ਦੂਰੀ 'ਤੇ ਇੱਕ ਲਾਈਨ ਨੂੰ ਚਿੰਨ੍ਹਿਤ ਕਰੋ।ਮੋਟੇ ਪਾਸੇ 'ਤੇ ਵਧੀਆ ਨਮੂਨਾ ਲੋਡਿੰਗ ਟੂਲ ਦੁਆਰਾ ਨਮੂਨੇ ਲੋਡ ਕਰੋ.ਨੋਟ: ਨਮੂਨੇ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਮੋਟੇ ਪਾਸੇ 'ਤੇ ਲੋਡ ਕੀਤੇ ਜਾਣੇ ਚਾਹੀਦੇ ਹਨ.ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨੇ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਾਲ ਝਿੱਲੀ ਵਿੱਚ ਦਾਖਲ ਹੋਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਮੋੜੋ, ਟੈਂਕ ਵੱਲ ਮੋਟਾ ਪਾਸੇ (ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਨਾਲ) ਦਾ ਸਾਹਮਣਾ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਨਾਲ ਅੰਤ ਨੂੰ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਡ ਵਿੱਚ ਰੱਖਿਆ ਗਿਆ ਹੈ।
3) ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ: ਪਾਵਰ ਸਪਲਾਈ ਚਾਲੂ ਕਰੋ, 0.4～0.6m A/cm ਝਿੱਲੀ, ਚੱਲਣ ਦਾ ਸਮਾਂ 30-45 ਮਿੰਟ ਹੈ।ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਚਲਾਉਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਪਾਵਰ ਬੰਦ ਕਰੋ।
4) ਦਾਗ ਅਤੇ ਸਾਫ਼ ਕਰੋ: ਝਿੱਲੀ ਨੂੰ ਟੈਂਕ ਵਿੱਚੋਂ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ, ਅਤੇ ਡੁਬੋ ਦਿਓit 5 ਮਿੰਟ ਲਈ ਡਾਈ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਪਾਓ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਇਸਨੂੰ ਸਫਾਈ ਘੋਲ ਵਿੱਚ 3-4 ਵਾਰ ਸਾਫ਼ ਕਰੋ ਜਦੋਂ ਤੱਕ ਬੈਕਗ੍ਰਾਉਂਡ ਦਾ ਰੰਗ ਸਾਫ਼ ਨਹੀਂ ਹੁੰਦਾ।ਸੀਰਮ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਨੂੰ ਬੈਂਡਾਂ 'ਤੇ ਦਿਖਾਇਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪੰਜ ਜ਼ੋਨ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਨਿਸ਼ਾਨਬੱਧ ਲਾਈਨ ਦੇ ਉੱਪਰਲੇ ਸਿਰੇ, ਐਲਬਿਊਮਿਨ, α1-ਗਲੋਲਿਨ, α2-ਗਲੋਲਿਨ, β-ਗਲੋਲਿਨ, γ-ਗਲੋਲਿਨ।
5) ਬਚਾਅ: ਸੁੱਕੀ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਪਾਓਜਥਾ10-15 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ ਘੋਲ ਨੂੰ ਸਾਫ਼ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਇਸਨੂੰ ਬਾਹਰ ਕੱਢੋ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਸਾਫ਼ ਸ਼ੀਸ਼ੇ 'ਤੇ ਚਿਪਕਾਓ, ਸੁੱਕਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਇਹ ਇੱਕ ਪਾਰਦਰਸ਼ੀ ਫਿਲਮ ਬਣ ਜਾਵੇਗੀਜਥਾ.
ਪ੍ਰਯੋਗਨਤੀਜਾ
ਸੀਰਮ ਦੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦਾ ਵੱਖਰਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਚੰਗਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਕੋਈ ਬੈਂਡ ਟੇਲਿੰਗ ਵਰਤਾਰਾ ਨਹੀਂ ਹੈ.ਨਤੀਜਿਆਂ ਦੀ ਦੁਹਰਾਉਣਯੋਗਤਾ ਟੈਸਟ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਪ੍ਰਯੋਗਕਰਤਾ ਦੇ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਕਾਰਨ ਬਦਲਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਦੁਹਰਾਉਣਯੋਗਤਾ ਉੱਚ ਹੁੰਦੀ ਹੈ।
ਸਿੱਟਾ
ਤੇਜ਼ ਕਲੀਨਿਕਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਖੋਜ ਪ੍ਰਣਾਲੀ (ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਟੈਂਕDYCP-38C,ਬਿਜਲੀ ਦੀ ਸਪਲਾਈDYY-6C ਅਤੇ ਉੱਤਮ ਨਮੂਨਾ ਲੋਡਿੰਗ WD-9404) ਸਾਡੇ ਦੁਆਰਾ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈਕੰਪਨੀ ਬੀਜਿੰਗ ਲਿਉਈ ਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਕੰ., ਲਿਮਿਟੇਡਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਲੋੜਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰਦਾ ਹੈ,ਅਤੇਨਤੀਜੇ ਦੁਬਾਰਾ ਪੈਦਾ ਕਰਨ ਯੋਗ, ਸਰਲ ਅਤੇ ਤੇਜ਼ ਹਨ, ਲਈ ਢੁਕਵੇਂ ਹਨਸਿੱਖਿਆਖੋਜ.
ਬੀਜਿੰਗ ਲਿਉਈਬਾਇਓਟੈਕਨਾਲੋਜੀ ਕੰ., ਲਿਮਟਿਡ ਜੀਵਨ ਵਿਗਿਆਨ ਉਦਯੋਗ ਲਈ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰਸਿਸ ਉਤਪਾਦਾਂ ਦੇ ਨਿਰਮਾਣ ਵਿੱਚ ਮਾਹਰ ਹੈ, ਜੋਚੀਨ ਵਿੱਚ 50 ਸਾਲਾਂ ਤੋਂ ਵੱਧ ਦਾ ਇਤਿਹਾਸ ਹੈ ਅਤੇ ਕੰਪਨੀ ਪੂਰੀ ਦੁਨੀਆ ਵਿੱਚ ਸਥਿਰ ਅਤੇ ਉੱਚ-ਗੁਣਵੱਤਾ ਵਾਲੇ ਉਤਪਾਦ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਵਿਕਾਸ ਦੇ ਸਾਲਾਂ ਦੇ ਦੌਰਾਨ, ਇਹ ਤੁਹਾਡੀ ਪਸੰਦ ਦੇ ਯੋਗ ਹੈ!
ਅਸੀਂ ਹੁਣ ਭਾਈਵਾਲਾਂ ਦੀ ਤਲਾਸ਼ ਕਰ ਰਹੇ ਹਾਂ, OEM ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਟੈਂਕ ਅਤੇ ਵਿਤਰਕਾਂ ਦਾ ਸਵਾਗਤ ਹੈ.
ਸਾਡੇ ਬਾਰੇ ਹੋਰ ਜਾਣਕਾਰੀ ਲਈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਈਮੇਲ ਦੁਆਰਾ ਸਾਡੇ ਨਾਲ ਸੰਪਰਕ ਕਰੋ[ਈਮੇਲ ਸੁਰੱਖਿਅਤ]ਜਾਂ[ਈਮੇਲ ਸੁਰੱਖਿਅਤ].
ਪੋਸਟ ਟਾਈਮ: ਨਵੰਬਰ-14-2022